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B834(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:B834(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 保存條件:-80℃ 基因型F-ompT hsdSB(rB-mB-) galdcm met(DE3)

  • 產(chǎn)品型號(hào):ABG208-50
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時(shí)間:2024-03-25
  • 訪  問  量:303

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號(hào)ABG208-50
規(guī)格50X100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

基因型

F-ompT hsdSB(rB-mB-) galdcm met(DE3)


簡(jiǎn)要說明

B834 是 BL21 菌株的父系菌株。該系列宿主菌是蛋氨酸缺陷型,可以用來高水平,高特異性的使用35S-蛋氨酸和硒代蛋氨酸標(biāo)記目的蛋白,進(jìn)行蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)研究。B834宿主菌也是 lon 和 ompT 蛋白酶缺陷型菌株。DE3 是溶源性的λDE3, 所以帶有T7RNA 聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于 pET 系列載體,及其他T7 啟動(dòng)子系列載體。


操作說明

1、取 100μl 冰上融化的B834(DE3)感受態(tài)細(xì)胞,加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻,冰上靜置25 分鐘。

2. 42℃水浴熱激 45 秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入 700μl 不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后 37℃,200rpm 復(fù)蘇60 分鐘。

4. 5000rpm 離心一分鐘收菌,留取100μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT 或LB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。


注意事項(xiàng)

1、感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。

2. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。

4. 誘導(dǎo)時(shí),IPTG 濃度可選(0.1-40mM 均可)。

5. 為獲得需要量的蛋白,最佳誘導(dǎo)時(shí)間,溫度,IPTG濃度需實(shí)驗(yàn)者優(yōu)化。








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